生物医药行业，本发明公开了一种具有抑制HIV-1反转录酶活性的蝉花（Cordyceps sobolifera）蛋白酶及其制备方法，包括以下步骤：1）破碎细胞；2）收集蛋白粗提物；3）从步骤2）收集的蛋白粗提物中分离纯化蛋白酶，得到的蛋白酶即为蝉花提取物，所述蛋白酶的分子量为31 KD，N-短氨基酸序列为AFSTQPGAVCGK，最适pH为12.4，最适温度为60℃左右，属于丝氨酸族蛋白酶；本发明纯化蛋白酶的活性为56780.98 U/mg。

依据本发明的制备方法所获得的蝉花提取物对HIV-1反转录酶有极其明显的抑制作用，在抗艾滋病新药研究领域中具有重要价值。